差速離心法是利用樣品中各種組分的沉降系數不同而進行分離的方法，又稱差分離心或差級離心。通常兩個組分的沉降系數差在10倍以上時可以用此法分離。例如某樣品中有大、中、小三個組分，用差速離心法分離時，把樣品放在離心管內，先按大組分的沉降系數選擇離心轉速和離心時間，當離心結束時正好使大組分全部沉降到離心管底部，這時中小組分中的一部分也會沉降到底部。若原始樣品液中三個組分的含量相等，則在原始樣品液中大組分占總組分量的三分之一。通過一次離心后分離出的大組分沉淀占總組分量約90%。如要進一步提純可以把此沉淀物再溶解，再按大組分的沉降條件離心，得到大組分的第二次離心沉淀。通過多次對沉淀和上清液差速離心，可以把三個沉降系數有差別的組份分離提純，所以這個方法又稱為分步離心法。
