大腸桿菌生化培養基的配方及原理

   2016-12-14 豆丁網503
核心提示:1、MR-VP培養基Methyl Red Voges Proskauer Broth用途: 用于大腸桿菌的甲基紅和V-P試驗(SN標準)。配方:(g/L)原理: 甲基紅(

1、MR-VP培養基Methyl Red Voges Proskauer Broth

用途:

  用于大腸桿菌的甲基紅和V-P試驗(SN標準)。

配方:(g/L)


原理:

  甲基紅(MR)試驗:腸桿菌科的細菌在糖代謝過程中,分解葡萄糖,產生丙酮酸,丙酮酸再被分解,生成甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸。大腸桿菌分解丙酮 酸,次生的酸類較多,pH為4.5或更低,甲基紅呈現紅色(陽性)。在產氣桿菌的培養液中一部分丙酮酸變為中性的乙酰甲基甲醇,生成的酸類較少,pH在5.4以上,甲基紅呈現桔黃色(陰性)。   

  乙酰甲基甲醇生成試驗(V—P試驗):細菌發酵葡萄糖生成丙酮酸,某些細菌可使丙酮酸脫羧形成乙酰甲基甲醇。在堿性溶液中,乙酰甲基甲醇可在空氣中氧化成二乙酰(丁二酮)。二乙酰再與蛋白胨中精氨酸的胍基作用,生成紅色化合物。試驗中加入α—萘酚是作催化劑,使反應的顏色加深,提高反應的敏感性。

用法:

 稱取本品 value="1.7" unitname="g" w:st="on">1.7g,加熱溶解于100ml 蒸餾水中,分裝試管, value="121" unitname="℃" w:st="on">121℃高壓滅菌 15 分鐘備用。

2、色氨酸肉湯

用途:

  用于沙門氏菌和志賀氏菌的生化檢測

配方:(g/L)


原理:

  細菌產生色氨酸酶,可分解蛋白胨中的色氨酸,生成靛基質(吲哚),靛基質與試劑對二甲基苯甲醛作用,生成玫瑰色靛基質。

3、結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)Violet Red Bile Agar

用途:

  用于大腸菌群的固體平板檢測(GB2008、SN標準)

配方:(g/L)


原理:

  結晶紫 是一種醫藥名稱,俗稱:紫藥水,有較好的殺菌作用,且無刺激性及毒性。大腸埃希氏菌產酸,菌落吸收中性紅呈紫紅色,周圍瓊脂培養基中中性紅遇酸變紅,膽鹽遇酸產生沉淀。

4、Korser氏枸椽酸鹽肉湯Korser Citrate Sodium Broth

用途:

  用于細菌枸椽酸鹽試驗(SN標準)

配方:(g/L)


原理:

  某些細菌能利用培養基中的枸櫞酸鹽作為唯一的碳源,也能利用其中的銨鹽作為唯一的氮源,細菌生長過程中分解枸櫞酸鹽產生碳酸鹽和分解銨鹽生成的氨,使培養基變堿,使指示劑呈堿性反應。

用法:

  稱取本品 value="4.7" hasspace="False" negative="False" numbertype="1" tcsc="0" w:st="on">4.7克,溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,每管10 mL,value="121" hasspace="False" negative="False" numbertype="1" tcsc="0" w:st="on">121℃高壓滅菌15分鐘,備用。 





 
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