QuickShuttle系列轉染試劑是一類具有、配方的陽離子型轉染試劑,具有高效、低毒和易于使用等優點,推薦用于常規哺乳動物細胞系的瞬時轉染和穩定細胞系構建。QuickShuttle區別于常規轉染試劑的兩個最主要特點是:(1)可以在貼壁細胞傳代后尚未貼壁時立即進行轉染(立傳立轉);(2)轉染操作可在一分鐘內完成。 重要提示 與常規轉染試劑不同,使用QuickShuttle可在貼壁細胞傳代后尚未貼壁時直接進行轉染(立傳立轉),從而可節省18~24小時的轉染前細胞培養時間。 QuickShuttle極大簡化了轉染操作,轉染試劑和質?;旌虾鬅o需室溫靜置孵育,可直接加入含血清的細胞培養基中進行轉染,而且無需在轉染后補加血清或更換培養基,整個轉染操作可在一分鐘內完成。 立傳立轉、一分鐘完成轉染操作和高轉染效率等優點使得部分使QuickShuttle的轉染實驗可在細胞傳代后24小時內完成,從而比常規轉染試劑節約24~48小時。 以24孔細胞板轉染實驗為例,推薦一次(即每孔)轉染的低內毒素質粒DNA用量為1~2μg、轉染試劑用量為3~5μl(請在正式實驗前根據不同細胞和不同培養基用報告基因進行優化),質粒和轉染試劑可用無菌生理鹽水稀釋。 QuickShuttle經過DMEM、RPMI-1640和M199等常規培養基測試,雖然在實驗中推薦使用DMEM,但有實驗結果表明M199能夠顯著增強QuickShuttle對Vero細胞和293FT細胞的轉染效果,因此可嘗試使用不同培養基對轉染條件進行優化。 QuickShuttle設計用于常規哺乳動物細胞系的瞬時轉染和穩定細胞系構建,不推薦但可嘗試用于哺乳動物原代細胞和二倍體細胞的轉染。 QuickShuttle轉染試劑建議常溫運輸,2~8oC保存(在-30 oC到室溫范圍內均可長時間穩定保存),無菌取用,有效期18個月。
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