鼠病病毒逆轉(zhuǎn)錄酶,現(xiàn)貨

 
品牌: 通善
產(chǎn)品規(guī)格: 25T/100T
單價: 面議
起訂: 1
供貨總量: 10000
發(fā)貨期限: 自買家付款之日起 3 天內(nèi)發(fā)貨
所在地: 江蘇 蘇州市
有效期至: 長期有效
最后更新: 2021-06-14 16:55
瀏覽次數(shù): 449
 
公司基本資料信息
詳細(xì)說明
逆轉(zhuǎn)錄酶 M-MLV Reverse Transcriptase(RNase H-)產(chǎn)品簡介

莫洛尼氏鼠病毒逆轉(zhuǎn)錄酶(M-MLV RT)能以單鏈RNA或DNA為模板,在引物的引發(fā)下合成與模板互補的DNA鏈。本逆轉(zhuǎn)錄酶是通過基因重組技術(shù)克隆表達(dá)的缺失突變型RNase H-的M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶,RNase H活性缺失,延伸能力強,可用于較長的cDNA合成以及高比例的全長cDNA文庫的構(gòu)建等。

來源

重組蛋白質(zhì)(E.coli);純度>95%,沒有檢測到其他蛋白酶和核酸酶活力。

活力單位定義

以Poly (A)為模板,Oligo (dT)為引物,在37℃條件下,10分鐘內(nèi)催化摻入1 nmol dTTP所需酶量定義為1個活性單位(U)。

應(yīng)用

用于 lst-Strand cDNA 的合成, RT-PCR 反應(yīng)以及 Real Time RT-PCR 反應(yīng)等。

儲存條件

冰袋運輸;長期保存-20℃或以下(12個月); 避免反復(fù)凍融,建議分裝保存5× M-MLV RT Buffer。

溶液成分
M-MLV RT (RNase H-) 儲存液 5X M-MLV RT Buffer
20 mM Tris-HCl,pH 7.5 250 mM Tris-HCl,pH 8.3
100 mM NaCl 250 mM KCl
1 mM EDTA 20 mM MgCl
5 mM DTT 50 mM DTT
0.1%(v/v) TritonX-100  
50%(V / V)Glycerin  
使用示例 在微量離心管中,配制下列模板RNA/引物混合液:
Template RNA Total RNA 1ng-5μg
poly(A) RNA 10pg-500ng
Primer Oligo(dT)18 Primer 0.5μg(100pmol)
Random Primers 0.2μg(100pmol)
Specific Primer 10-20pmol
DEPC-treated water Up to 12.5μl
65℃保溫5分鐘后迅速在冰上冷卻2分鐘; 短暫離心后,加入以下組分:
5X M-MLV RT Buffer 4μl
dNTP(10mM) 2μl
M-MLV RT (RNase H-)(200U/μL) 1μl
RNase Inhibitor 0.5μl
Total volume 20μl
42℃孵育1小時;
以Random Primers作為反轉(zhuǎn)錄引物時應(yīng)先于25℃,反應(yīng)10分鐘,然后再于42℃條件孵育1小時。 70℃加熱15分鐘以終止反應(yīng)。得到cDNA溶液可直接用于2nd-Strand cDNA的合成或PCR擴增。

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