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公司基本資料信息
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莫洛尼氏鼠病毒逆轉(zhuǎn)錄酶(M-MLV RT)能以單鏈RNA或DNA為模板,在引物的引發(fā)下合成與模板互補的DNA鏈。本逆轉(zhuǎn)錄酶是通過基因重組技術(shù)克隆表達(dá)的缺失突變型RNase H-的M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶,RNase H活性缺失,延伸能力強,可用于較長的cDNA合成以及高比例的全長cDNA文庫的構(gòu)建等。
來源重組蛋白質(zhì)(E.coli);純度>95%,沒有檢測到其他蛋白酶和核酸酶活力。
活力單位定義以Poly (A)為模板,Oligo (dT)為引物,在37℃條件下,10分鐘內(nèi)催化摻入1 nmol dTTP所需酶量定義為1個活性單位(U)。
應(yīng)用用于 lst-Strand cDNA 的合成, RT-PCR 反應(yīng)以及 Real Time RT-PCR 反應(yīng)等。
儲存條件冰袋運輸;長期保存-20℃或以下(12個月); 避免反復(fù)凍融,建議分裝保存5× M-MLV RT Buffer。
溶液成分M-MLV RT (RNase H-) 儲存液 | 5X M-MLV RT Buffer |
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20 mM Tris-HCl,pH 7.5 | 250 mM Tris-HCl,pH 8.3 |
100 mM NaCl | 250 mM KCl |
1 mM EDTA | 20 mM MgCl |
5 mM DTT | 50 mM DTT |
0.1%(v/v) TritonX-100 | |
50%(V / V)Glycerin |
Template RNA | Total RNA | 1ng-5μg |
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poly(A) RNA | 10pg-500ng | |
Primer | Oligo(dT)18 Primer | 0.5μg(100pmol) |
Random Primers | 0.2μg(100pmol) | |
Specific Primer | 10-20pmol | |
DEPC-treated water | Up to 12.5μl |
5X M-MLV RT Buffer | 4μl |
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dNTP(10mM) | 2μl |
M-MLV RT (RNase H-)(200U/μL) | 1μl |
RNase Inhibitor | 0.5μl |
Total volume | 20μl |
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