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公司基本資料信息
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1.
簡介:
膳食纖維是指碳水化合物及其相類似物質的總和,包括多糖、寡糖、木質素以及相關的植物物質。主要有纖維素、半纖維素、果膠及親水膠體物質,如樹膠、海藻多糖等組分;另外還包括植物細胞壁中所含有的木質素;不被人體消化酶所分解的物質,如抗性淀粉、抗性糊精、抗性低聚糖、改性纖維素、黏質、寡糖以及少量相關成分,如蠟紙、角質、軟木脂等。
總膳食纖維檢測試劑盒是根據AOAC991.43
,AOAC 985.29
,AACC32-07
和AACC 32-05
方法開發的,也適用于其它方法,如AACC Method 32-21,AACC method32-06
2.
檢測原理
脫脂(如大于10%
)干燥后的樣品經熱穩定a-
淀粉酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化,酶解液通過乙醇沉淀、過濾,乙醇和丙酮洗滌殘渣后干燥、稱重,得到總膳食纖維(TDF
)殘渣;
酶解液通過直接過濾、熱水洗滌殘渣,干燥后稱重,得到不溶性膳食纖維(IDF
)殘渣;
濾液用乙醇沉淀,過濾、干燥、稱重,得到可溶性膳食纖維(SDF
)殘渣。
TDF
、IDF
和SDF
的殘渣扣除蛋白質
、灰分和空白即得TDF、
IDF和SDF
含量。
該檢測試劑盒的主要優勢在于直接提供高純度的酶,酶的活力是標準
化的,而標準化的a-淀粉酶的活力在測量抗性淀粉是公認的。
淀粉葡萄糖苷酶中基本沒有纖維素酶,而其他常用的酶制劑中常含有這種污染
物,這將導致溶解和低估β-
葡聚糖。該試劑盒提供的酶都是穩定的液體,可以保存到試劑盒有效期,并且是直接應用液,不需要使用前再溶解。
3.
用途
適用于檢測谷物、水果、蔬菜和加工食品
中的總膳食纖維(TDF)、不溶性
膳食纖維(IDF
)和可溶性膳食纖維(SDF
)的檢測。
4.
提供試劑及材料
每一個盒中的提供的酶試劑足夠進行200
個試驗,如另外需要可單獨訂貨:
Bottle 1
,1瓶:
熱穩定a-
淀粉酶(20mL
,~ 3,000 U/mL
,Ceralpha method
;~ 10,000 U/mL on
soluble starch
。).
Bottle 2
,1瓶:
純化的蛋白酶(20mL
,50 mg/mL; ~ 350 tyrosine Units/mL
。)
Bottle 3
,2瓶:
淀粉葡萄糖苷酶(20mL
,3300 U/mL on soluble starch
。)
總計:80ml
(4
瓶20ml
包裝)
另外,實驗中需要用到硅藻土:
酸洗硅藻土Celite?545,100g
或500g
包裝,(貨號:G-CEL100
,G-CEL500)
其他相關試劑盒:
膳食纖維質控試劑盒(貨號:K-TSCK
)
質控試劑盒用于檢驗酶的效力和純度,含下表中所列物質每種一瓶,并附有技術數據單(K-TSCK)
,盒中每種物質足夠10
次測試用。
品種
數量
β-
葡聚糖(大麥)
1.0g
高直鏈玉米淀粉
10.0g
淀粉(小麥)
10.0g
酪蛋白
5.0g
果膠
1.0g
5.
需要的設備和試劑
5.1
設備
A.
高型無導流口燒杯:400mL
或600mL
B.
坩堝:具粗面燒結玻璃板,孔徑40-60 μm
。清洗后在馬福爐中525
℃灰化6
小時或過夜,用真空泵除去硅藻土和灰分,室溫下用2%
清洗液浸泡1
小時,用水和蒸餾水沖洗干凈,用15 mL
丙酮沖洗后風干,加1g
硅藻土到干燥的坩堝中,在130
℃干燥至恒重,在干燥器中冷卻1
小時,記下坩堝(包括硅藻土)的重量。
C.
真空溶劑過濾裝置:真空泵或有調節裝置的抽吸器,1L
的抽濾瓶,側壁有抽濾口,以及抽濾瓶配套的橡膠塞。用于酶解液的抽濾。
D.
恒溫振蕩水浴:95-100℃
E.
分析天平:感量0.1mg
F.
天平(臺秤):4 000g
量程,感量0.1g
G.
馬福爐:525±5°C
,
H.
烘箱:103±2℃
,130±3℃
I.真空干燥箱
J.
干燥器:二氧化硅或等同干燥劑
K. PH
計,具有溫度補償功能。
L.
微量凱氏定氮儀。
M.
移液器,50-200 μL
,5 mL
,一次性移液吸頭。
N.
計時器。
O.
橡膠刮勺
P.
磁力攪拌器
5.2
試劑
A. 95%
乙醇(體積比),
B. 78 %
乙醇:取821mL95%
乙醇置于容量瓶中,用水稀釋到刻度,混勻。
C.
丙酮
D.
蒸餾水或去離子水
E.
清洗液Micro (International Products Corp.,Trenton,NJ).
,配成2%
液體
F. MES/TRIS
緩沖液(0.05mol/L
):
稱取19.52g(MES) (Sigma, M 8250)和14.2 g
(TRIS)(Sigma,T1503)惠誠生物 手機微信:18018625233 QQ:2303607288
膳食纖維檢測試劑盒是根據AOAC991.43,AOAC 985.29,AACC32-07和AACC 32-05方法開發的,也適用于其它方法,如AACC Method 32-21,AACC method32-06。2. 檢測原理脫脂(如大于10%)干燥后的樣品經熱穩定a-淀FEN酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化,酶解液通過乙醇沉淀、過濾,乙醇和丙酮洗滌殘渣后干燥、稱重,得到總膳食纖維(TDF)殘渣;酶解液通過直接過濾、熱水洗滌殘渣,干燥后稱重,得到不溶性膳食纖維(IDF)殘渣;濾液用乙醇沉淀,過濾、干燥、稱重,得到可溶性膳食纖維(SDF)殘渣。TDF、IDF和SDF的殘渣扣除蛋白質、灰分和空白即得TDF、IDF和SDF含量。該 檢測試劑盒的主要優勢在于直接提供高純度的酶,酶的活力是標準化的,而標準化的a-淀FEN酶的活力在測量抗性淀粉是公認的。楊樹彥 13788987962 QQ:1961275959淀粉葡萄糖苷酶中基本沒有纖維素酶,而其他常用的酶制劑中常含有這種污染物,這將導致溶解和低估β-葡聚糖。楊樹彥 13788987962 QQ:1961275959該試劑盒提供的酶都是穩定的液體,可以保存到試劑盒有效期,并且是直接應用液,不需要使用前再溶解。3. 用途適用于檢測谷物、水果、蔬菜和加工食品中的總膳食纖維(TDF)、不溶性膳食纖維(IDF)和可溶性膳食纖維(SDF)的檢測。4. 提供試劑及材料每一個盒中的提供的酶試劑足夠進行200個試驗,如另外需要可單獨訂貨:Bottle 1 ,1瓶:熱穩定a-淀FEN酶(20mL,~ 3,000 U/mL,Ceralpha method;~ 10,000 U/mL onsoluble starch。).Bottle 2,1瓶:純化的蛋白酶(20mL,50 mg/mL; ~ 350 tyrosine Units/mL。)Bottle 3,2瓶:淀粉葡萄糖苷酶(20mL,3300 U/mL on soluble starch。)總計:80ml(4瓶20ml包裝)另外,實驗中需要用到硅藻土:酸洗硅藻土Celite?545, 100g或500g包裝,(貨號:G-CEL100,G-CEL500)其他相關試劑盒:膳食纖維質控試劑盒(貨號:K-TSCK)質控試劑盒用于檢驗酶的效力和純度,含下表中所列物質每種一瓶,并附有技術數據單(K-TSCK),盒中每種物質足夠10次測試用。
品種
數量
β-葡聚糖(大麥)
1.0g
高直鏈玉米淀粉
10.0g
淀粉(小麥)
10.0g
酪蛋白
5.0g
果膠
1.0g
5. 需要的設備和試劑5.1 設備A. 高型無導流口燒杯:400mL或600mLB. 坩堝:具粗面燒結玻璃板,孔徑40-60 μm。清洗后在馬福爐中525℃灰化6小時或過夜,用真空泵除去硅藻土和灰分,室溫下用2%清洗液浸泡1小時,用水和蒸餾水沖洗干凈,用15 mL丙酮沖洗后風干,加1g硅藻土到干燥的坩堝中,在130℃干燥至恒重,在干燥器中冷卻1小時,記下坩堝(包括硅藻土)的重量。C. 真空溶劑過濾裝置:真空泵或有調節裝置的抽吸器,1L的抽濾瓶,側壁有抽濾口,以及抽濾瓶配套的橡膠塞。用于酶解液的抽濾。D. 恒溫振蕩水?。?5-100℃E. 分析天平:感量0.1mgF. 天平(臺秤):4 000g量程,感量0.1gG. 馬福爐:525±5°C,H. 烘箱:103±2℃,130±3℃I. 真空干燥箱J. 干燥器:二氧化硅或等同干燥劑K. PH計,具有溫度補償功能。L. 微量凱氏定氮儀。M. 移液器,50-200 μL,5 mL,一次性移液吸頭。N. 計時器。O. 橡膠刮勺P. 磁力攪拌器5.2 試劑A. 95%乙醇(體積比),B. 78 %乙醇:取821mL95%乙醇置于容量瓶中,用水稀釋到刻度,混勻。C. 丙酮D. 蒸餾水或去離子水E. 清洗液Micro (International Products Corp.,Trenton,NJ).,配成2%液體F. MES/TRIS緩沖液(0.05mol/L):稱取19.52g (MES) (Sigma, M 8250)和14.2 g(TRIS) (Sigma,T1503),用1.7L蒸餾水溶解,用6mol/L氫氧化鈉調節PH至8.2±0.1,加水稀釋到2L(注意24℃時PH值為8.2,20℃時PH值為8.3,27-28℃時PH值為8.1)G. 鹽酸溶液(0.561 mol/L):取93.5mL 6 mol/L的鹽酸,加入700mL水中,混勻后用水定容到1L。H. 氫氧化鈉I. PH值標準緩沖液:PH值為 4.0,7.0 和10.0。6. 酶的純化和標準化6.1 根據AACC/AOAC的膳食纖維檢測方法,必須確保酶的純度。6.1.1 淀粉葡萄糖苷酶被木聚糖酶、纖維素酶和果膠酶污染,會低估β-葡聚糖、阿拉伯木聚糖和果膠的含量。6.1.2 熱穩定a-淀粉酶被污染,會影響抗性淀粉的測量。6.1.3 蛋白酶被4-β-葡聚糖酶污染,會低估β-葡聚糖的含量。6.1.4 如不是使用該的酶,請參考下面方法測定
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