近日“瘦肉精”事件的發生使人們再次將注意力集中到動物體內的β-受體激動劑的檢測。 我們平常說的“瘦肉精”是一類動物用藥，有數種藥物被稱為瘦肉精，例如萊克多巴胺（Ractopamine）及克倫特羅（Clenbuterol）等。沃特世作為色譜分析行業的領導者，再一次展現了公司集成樣品前處理SPE產品、色譜產品、質譜產品于一體的技術優勢，在第一時間推出了包含前處理在內的解決方案。
使用沃特世混合型強陽離子交換OASIS® MCX SPE固相萃取柱結合ACQUITY UPLC®/Xevo® TQ超高效液相色譜串聯四級桿質譜聯用儀，可以在5分鐘內輕松、快速、準確的檢測到極低含量的“瘦肉精”類物質。例如在豬肉基質中的克倫特羅（Clenbuterol）可以達到低于0.005ppb（5ppt）的檢測限。并且在0.05ppb基質濃度下6針重復進樣RSD為2.65%。對于豬尿液當中的克倫特羅（Clenbuterol）甚至可以達到0.001ppb（1ppt）的檢測限。沃特世UPLC/Xevo TQ 免費附帶的Quanpedia方法庫已經自帶了超過28種常見β-受體激動劑的MRM條件，您無需再對這些化合物進行質譜參數的調諧即可輕松獲取分析方法。
圖一：沃特世UPLC/Xevo TQ超高效液相色譜串聯四級桿質譜聯用儀
圖二：基質當中0.05ppb克倫特羅（Clenbuterol）的檢出信噪比S/N(PtP)>60
圖三：克侖特羅系由尿樣獲得，按照(A)20pg/mL，(B)10pg/mL和(C)1pg/mL加樣。
豬肉及豬肝臟中的β-受體激動劑（克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布它林、塞曼特羅、塞布特羅、溴代克侖特羅、溴布特羅、苯氧丙酚胺）的前處理方法如下：
1. 取2 g 粉碎樣品，加入8 mL 0.2 M 的pH為5.2的乙酸鈉緩沖液，充分混勻后，加入50 μL β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶混勻，于37 ˚C水浴水解過夜。
2. 將水解液振蕩15 min，在5000 rpm條件下離心分離10 min后，取4 mL上清液，添加100 μL10ng/mL的內標溶液(克倫特羅-D9,沙丁胺醇-D3)混勻,加入5 L0.1M高氯酸混合均勻 并 調節溶液pH 值到1 ± 0.3。以5000 rpm條件下離心分離10 min后，移取上清液并用 10 M 的氫氧化鈉溶液調節pH值到11。
3. 加入10 mL 飽和氯化鈉溶液和10 mL 異丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液，離心分離后取有 機相，在40˚C 水浴下用氮氣將其吹干。
4. 提取殘渣中加入5 mL 0.2 M乙酸鈉緩沖液(pH 5.2)，超聲混勻溶解殘渣。
5．進行下一步固相萃取凈化。（參考下圖）
解決方案涉及產品信息：
SPE固相萃取柱：Oasis MCX 3cc/60mg （產品部件號186000254）
UPLC色譜柱：ACQUITY UPLC HSS T3，1.8um 2.1mm*50mm（產品部件號186003538）
HPLC色譜柱：Atlantis T3，5um 2.1mm*150mm（產品部件號186003736）
日期：2011-05-03
使用沃特世混合型強陽離子交換OASIS® MCX SPE固相萃取柱結合ACQUITY UPLC®/Xevo® TQ超高效液相色譜串聯四級桿質譜聯用儀，可以在5分鐘內輕松、快速、準確的檢測到極低含量的“瘦肉精”類物質。例如在豬肉基質中的克倫特羅（Clenbuterol）可以達到低于0.005ppb（5ppt）的檢測限。并且在0.05ppb基質濃度下6針重復進樣RSD為2.65%。對于豬尿液當中的克倫特羅（Clenbuterol）甚至可以達到0.001ppb（1ppt）的檢測限。沃特世UPLC/Xevo TQ 免費附帶的Quanpedia方法庫已經自帶了超過28種常見β-受體激動劑的MRM條件，您無需再對這些化合物進行質譜參數的調諧即可輕松獲取分析方法。
圖一：沃特世UPLC/Xevo TQ超高效液相色譜串聯四級桿質譜聯用儀
圖二：基質當中0.05ppb克倫特羅（Clenbuterol）的檢出信噪比S/N(PtP)>60
圖三：克侖特羅系由尿樣獲得，按照(A)20pg/mL，(B)10pg/mL和(C)1pg/mL加樣。
豬肉及豬肝臟中的β-受體激動劑（克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布它林、塞曼特羅、塞布特羅、溴代克侖特羅、溴布特羅、苯氧丙酚胺）的前處理方法如下：
1. 取2 g 粉碎樣品，加入8 mL 0.2 M 的pH為5.2的乙酸鈉緩沖液，充分混勻后，加入50 μL β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶混勻，于37 ˚C水浴水解過夜。
2. 將水解液振蕩15 min，在5000 rpm條件下離心分離10 min后，取4 mL上清液，添加100 μL10ng/mL的內標溶液(克倫特羅-D9,沙丁胺醇-D3)混勻,加入5 L0.1M高氯酸混合均勻 并 調節溶液pH 值到1 ± 0.3。以5000 rpm條件下離心分離10 min后，移取上清液并用 10 M 的氫氧化鈉溶液調節pH值到11。
3. 加入10 mL 飽和氯化鈉溶液和10 mL 異丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液，離心分離后取有 機相，在40˚C 水浴下用氮氣將其吹干。
4. 提取殘渣中加入5 mL 0.2 M乙酸鈉緩沖液(pH 5.2)，超聲混勻溶解殘渣。
5．進行下一步固相萃取凈化。（參考下圖）
解決方案涉及產品信息：
SPE固相萃取柱：Oasis MCX 3cc/60mg （產品部件號186000254）
UPLC色譜柱：ACQUITY UPLC HSS T3，1.8um 2.1mm*50mm（產品部件號186003538）
HPLC色譜柱：Atlantis T3，5um 2.1mm*150mm（產品部件號186003736）
日期：2011-05-03
