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公司基本資料信息
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【檢測(cè)原理】氯霉素是應(yīng)用廣泛的抗菌素,對(duì)畜禽疾病控制和治療起重要作用。但其存在嚴(yán)重的副作用, 能引起人的再生障礙性,粒細(xì)胞缺乏癥等疾病,歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已相繼禁止或嚴(yán)格禁止使用。
實(shí)創(chuàng)生科的氯霉素酶聯(lián)免疫試劑盒使用生物技術(shù)開(kāi)發(fā),具有方便、快速、靈敏等特點(diǎn)。
氯霉素酶聯(lián)免疫試劑盒利用氯霉素抗體與氯霉素可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì),先在酶標(biāo)板上預(yù)包被抗原,再 加入標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)和氯霉素酶標(biāo)抗體,樣本或 標(biāo)準(zhǔn)品中的氯霉素藥物與固定在酶標(biāo)板上的抗原 競(jìng)爭(zhēng)氯霉素酶標(biāo)抗體,加入底物催化顯色。 此時(shí)顯色深度與標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)中氯霉素藥物的 含量成反比。
【使用方法】
準(zhǔn)備:將要使用的酶標(biāo)板條插入酶標(biāo)板架上,并記錄各標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,為減小檢測(cè)值波動(dòng)建議做雙孔平行實(shí)驗(yàn)(每個(gè)樣本/標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)兩孔),未使用的酶標(biāo)板條用自封袋密封后,保存于2-8℃環(huán)境中以防變質(zhì)。
加樣:向?qū)?yīng)微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品工作液/樣品溶液50μL,再向每孔中加入50μL酶標(biāo)記物工作液。
孵育:輕輕振蕩酶標(biāo)板10s,使孔內(nèi)液體充分混勻后,蓋好蓋板膜于25℃避光反應(yīng)30 min。
洗滌:取出酶標(biāo)板后小心揭開(kāi)蓋板膜,倒出板孔中液體后,在每孔加 250μL洗滌工作液,浸泡15-30s后倒掉洗滌工作液,然后再加入洗滌工作液重復(fù)洗滌3-4次后,將酶標(biāo)板倒置于吸水紙上,用力拍干。
顯色:在每孔中加入100μL 底物A和底物B的混合液(注:底物A液、底物B液必須按體積1:1充分混合,混合液在10 min內(nèi)使用,切不可使用金屬容器盛裝、攪拌試劑以免底物變質(zhì)失效)。
孵育:輕輕振蕩酶標(biāo)板15s,使孔內(nèi)液體充分混勻后,蓋好蓋板膜于25℃避光反應(yīng)15-20 min。
終止:在反應(yīng)后的微孔中加入終止液50μL/孔,底物液由藍(lán)變黃表明終止成功。
讀數(shù):終止后的酶標(biāo)板應(yīng)在5min內(nèi)用酶標(biāo)儀讀數(shù),建議使用450nm、630nm雙波長(zhǎng)讀取酶標(biāo)板吸光度值。
【判定結(jié)果】
設(shè)各標(biāo)準(zhǔn)品(或樣品)的吸光度平均值為B,零標(biāo)準(zhǔn)(濃度為0ppb的標(biāo)準(zhǔn)品)吸光度平均值B0以(B/B0)×為各標(biāo)準(zhǔn)品(或樣品)對(duì)應(yīng)的吸光度的百分比。
使用半對(duì)數(shù)系統(tǒng)代入標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的吸光度的百分比,與標(biāo)準(zhǔn)品濃度擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
將待檢樣品吸光度的百分比代入擬合出的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程中,即可得出樣品對(duì)應(yīng)的濃度, 后乘以樣品相應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中檢測(cè)物含量。
氯霉素酶聯(lián)免疫試劑盒為定量或半定量試劑盒,建議用于大量樣本篩查分析。若檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,建議使用儀器方法開(kāi)展確證實(shí)驗(yàn)(如GC/MS、LC-MS/MS等)
【注意事項(xiàng)】
1、使用試劑盒前,請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。
2、試劑盒使用前,需將盒內(nèi)各組份置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上回溫至室溫(25±2℃)(提示:約1 h)。
3、試劑使用前需搖勻,混合時(shí)應(yīng)避免出現(xiàn)氣泡。
4、槍頭為一次性用品,為防止試劑交叉污染,檢測(cè)過(guò)程中所用槍頭不得重復(fù)使用。
5、請(qǐng)勿使用過(guò)期試劑盒,不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用。
6、樣品處理完畢后請(qǐng)立即分析,否則可能影響檢測(cè)結(jié)果。
7、底物A液、底物B液均為無(wú)色透明液體,若在使用前已變成藍(lán)色,或混合后立即變藍(lán),說(shuō)明試劑已污染或變質(zhì)。
8、加樣過(guò)程在保證精度的前提下一定要迅速,以免反應(yīng)時(shí)間差對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。
9、終止液中含有硫酸,若不小心濺上皮膚或衣物請(qǐng)立即用大量清水沖洗。若不慎入眼,請(qǐng)?jiān)趶氐浊逑春笕メt(yī)院檢查。
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