非洲豬瘟快速測(cè)試儀現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)步驟及樣品前處理

   2018-11-29 深圳市芬析儀器制造有限公司567
核心提示:非洲豬瘟快速測(cè)試儀現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)步驟及樣品前處理:CSY-E96D非洲豬瘟快速測(cè)試儀可快速畜牧類疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍(lán)

非洲豬瘟快速測(cè)試儀現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)步驟及樣品前處理:CSY-E96D非洲豬瘟快速測(cè)試儀可快速畜牧類疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍(lán)耳、偽狂犬等疾病。

 

非洲豬瘟快速測(cè)試儀樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

3. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

 

4.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

5.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

非洲豬瘟快速測(cè)試儀操作步驟:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔,陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL;

3.待測(cè)樣本孔加待測(cè)樣本10μL,樣本稀釋液40μL;

4.隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗原100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光水浴鍋孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在非洲豬瘟快速測(cè)試儀450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
非洲豬瘟快速測(cè)試儀

自從2018年8月以來,非洲豬瘟疫情在我國(guó)來勢(shì)洶洶,盡管采取了嚴(yán)厲措施予以防控,但疫情仍在持續(xù)發(fā)酵中。

事實(shí)上,在整個(gè)產(chǎn)業(yè)鏈中,從生豬養(yǎng)殖到餐桌,要切實(shí)防控疫情,涉及到眾多監(jiān)管部門,離不開多方的群策群力,單靠一個(gè)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部是無法解決全程問題的。

根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的通報(bào),盡管“我國(guó)發(fā)生非洲豬瘟疫情以來,所有已發(fā)疫情均已得到及時(shí)有效處置,目前疫情呈點(diǎn)狀發(fā)生,總體可控”,但也承認(rèn)“非洲豬瘟病毒在我國(guó)已形成了一定污染面,傳統(tǒng)的生產(chǎn)、流通、消費(fèi)方式短期內(nèi)難以根本改變,疫情傳播途徑錯(cuò)綜復(fù)雜,風(fēng)險(xiǎn)難以完全阻斷,且目前尚無有效疫苗,以上因素共同決定了防控工作的復(fù)雜性和長(zhǎng)期性”。

 

非洲豬瘟快速測(cè)試儀現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)步驟及樣品前處理準(zhǔn)備工作:

1.請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。

2.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象;放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶完全溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃

3.20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。


非洲豬瘟快速測(cè)試儀實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材:

1.檢測(cè)儀(450nm)

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱或水浴鍋

4.蒸餾水或去離子水



 
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