食品中三聚氰胺檢測的固相萃取方法MCX
（Copure ® MCX）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為牛奶樣品中三聚氰胺檢測的前處理方法，HPLC法作為檢測手段。Copure™ MCX (60mg/3mL)柱凈化效果良好，回收率滿足測試要求，重現性好，與知名廠商同型號柱性能相當。
二、實驗目標物
三聚氰胺 (CAS:108-78-1)
三、應用范圍
本方法適用于食品中三聚氰胺的HPLC檢測及確證。
四、參考標準
《GB/T 22388-2008 原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ® MCX固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COMCX360)；W品牌MCX固相萃取柱60mg/3mL。
六、實驗方法
1、樣品提取
稱取2.0ｇ試樣(精確至0.001 g)于50 mL離心管中，加入15 mL 1%三氯乙酸溶液和5 mL乙腈，超聲提取10 min， 再振蕩提取10 min，4000 r/min離心10 min。上清液經三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾后，用三氯乙酸溶液定容至 25 mL，移取5 mL濾液，加入5 mL水混勻后做待凈化液。
2、SPE柱凈化
(1)活化：使用前依次用3 mL甲醇、5 mL水活化柱子。
(2)上樣和洗脫：將待凈化液轉移至固相萃取柱中。依次用3 mL水、3 mL甲醇洗滌，抽至近干后，用6 mL 5%氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過1 mL/min。
(3)重新溶解：洗脫液于50 ℃下用氮氣吹干，殘留物用1 mL流動相定容，渦旋混合1 min，過微孔濾膜后，供 HPLC測定。
3、HPLC條件 設備：Waters Alliance 2695
檢測器：Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：240 nm 色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相：離子對試劑緩沖液(準確稱取2.10 g檸檬酸和2.16 g辛烷磺酸鈉，加入約980 mL水溶解，調節PH至
3.0后，定溶至1 L備用)-乙腈(80:20, v/v)。
柱溫：室溫
進樣體積：20 µL
流速：1 mL/min
七、實驗結果
1、2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺的添加回收結果
表1 2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺的添加回收結果
表2 W品牌MCX柱2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺的添加回收結果
2、添加水平為2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺檢測色譜圖
圖1 添加水平為2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺檢測色譜圖
（Copure ® MCX）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為牛奶樣品中三聚氰胺檢測的前處理方法，HPLC法作為檢測手段。Copure™ MCX (60mg/3mL)柱凈化效果良好，回收率滿足測試要求，重現性好，與知名廠商同型號柱性能相當。
二、實驗目標物
三聚氰胺 (CAS:108-78-1)
三、應用范圍
本方法適用于食品中三聚氰胺的HPLC檢測及確證。
四、參考標準
《GB/T 22388-2008 原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ® MCX固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COMCX360)；W品牌MCX固相萃取柱60mg/3mL。
六、實驗方法
1、樣品提取
稱取2.0ｇ試樣(精確至0.001 g)于50 mL離心管中，加入15 mL 1%三氯乙酸溶液和5 mL乙腈，超聲提取10 min， 再振蕩提取10 min，4000 r/min離心10 min。上清液經三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾后，用三氯乙酸溶液定容至 25 mL，移取5 mL濾液，加入5 mL水混勻后做待凈化液。
2、SPE柱凈化
(1)活化：使用前依次用3 mL甲醇、5 mL水活化柱子。
(2)上樣和洗脫：將待凈化液轉移至固相萃取柱中。依次用3 mL水、3 mL甲醇洗滌，抽至近干后，用6 mL 5%氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過1 mL/min。
(3)重新溶解：洗脫液于50 ℃下用氮氣吹干，殘留物用1 mL流動相定容，渦旋混合1 min，過微孔濾膜后，供 HPLC測定。
3、HPLC條件 設備：Waters Alliance 2695
檢測器：Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：240 nm 色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相：離子對試劑緩沖液(準確稱取2.10 g檸檬酸和2.16 g辛烷磺酸鈉，加入約980 mL水溶解，調節PH至
3.0后，定溶至1 L備用)-乙腈(80:20, v/v)。
柱溫：室溫
進樣體積：20 µL
流速：1 mL/min
七、實驗結果
1、2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺的添加回收結果
表1 2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺的添加回收結果
表2 W品牌MCX柱2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺的添加回收結果
2、添加水平為2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺檢測色譜圖
圖1 添加水平為2.5mg/kg牛奶基質中三聚氰胺檢測色譜圖
