水產品中氟苯尼考檢測的固相萃取方法
（Copure ® C18）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC作為分析方法，檢測水產品中氟苯尼考殘留水平。該方法操 作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
氟苯尼考（CAS: 73231-34-2）。
三、應用范圍
本方法適用于水產品中氟苯尼考的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
biocomma ® Copure ®C18固相萃取柱500mg/6mL(Cat. No. COC186500)。
五、實驗步驟
1、樣品提取
準確稱取草魚肉5 g（精確到0.001 g），加入乙酸乙酯15 mL，高速均質1 min，加入3 g無水硫酸鈉渦旋振蕩1 min，搖床振蕩10 min。4000 r/min轉速離心5 min。將上清液轉移至梨形瓶中，于45 ℃旋蒸至近干，用6 mL水溶解殘渣，5 mL×2次正己烷除脂，棄去正己烷層，待凈化。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：C18固相萃取柱使用前依次使用5 mL甲醇和5 mL水活化，保持柱體濕潤。
(2) 上樣和洗脫：將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中，以2 mL/min的流速過柱，棄去濾液，用5 mL水淋
洗固相萃取柱，棄去淋洗液，抽干5 min。用6 mL甲醇洗脫固相萃取柱，收集洗脫液。
(3) 重新溶解：洗脫液于45 ℃氮吹吹干，用1 mL甲醇溶液定容，0.22 μm微孔濾膜過濾，供HPLC上機測試。
3、HPLC條件 設備：Waters Alliance 2695
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm, 5 μm)
檢測器：Waters 2487 紫外檢測器
檢測波長：224 nm
流動相：A：水 B：乙腈
洗脫方式：等度洗脫
表1 等度洗脫條件
流速：1 mL/min
進樣體積：20 μL
六、實驗結果
1、草魚肉中氟苯尼考的1 mg/kg添加回收結果
表2 草魚肉中氟苯尼考的1 mg/kg添加回收結果
2、添加水平為1 mg/kg草魚肉中氟苯尼考殘留物色譜圖
圖1 添加水平為1 mg/kg草魚肉中氟苯尼考殘留物色譜圖
（Copure ® C18）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC作為分析方法，檢測水產品中氟苯尼考殘留水平。該方法操 作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
氟苯尼考（CAS: 73231-34-2）。
三、應用范圍
本方法適用于水產品中氟苯尼考的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
biocomma ® Copure ®C18固相萃取柱500mg/6mL(Cat. No. COC186500)。
五、實驗步驟
1、樣品提取
準確稱取草魚肉5 g（精確到0.001 g），加入乙酸乙酯15 mL，高速均質1 min，加入3 g無水硫酸鈉渦旋振蕩1 min，搖床振蕩10 min。4000 r/min轉速離心5 min。將上清液轉移至梨形瓶中，于45 ℃旋蒸至近干，用6 mL水溶解殘渣，5 mL×2次正己烷除脂，棄去正己烷層，待凈化。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：C18固相萃取柱使用前依次使用5 mL甲醇和5 mL水活化，保持柱體濕潤。
(2) 上樣和洗脫：將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中，以2 mL/min的流速過柱，棄去濾液，用5 mL水淋
洗固相萃取柱，棄去淋洗液，抽干5 min。用6 mL甲醇洗脫固相萃取柱，收集洗脫液。
(3) 重新溶解：洗脫液于45 ℃氮吹吹干，用1 mL甲醇溶液定容，0.22 μm微孔濾膜過濾，供HPLC上機測試。
3、HPLC條件 設備：Waters Alliance 2695
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm, 5 μm)
檢測器：Waters 2487 紫外檢測器
檢測波長：224 nm
流動相：A：水 B：乙腈
洗脫方式：等度洗脫
表1 等度洗脫條件
流速：1 mL/min
進樣體積：20 μL
六、實驗結果
1、草魚肉中氟苯尼考的1 mg/kg添加回收結果
表2 草魚肉中氟苯尼考的1 mg/kg添加回收結果
2、添加水平為1 mg/kg草魚肉中氟苯尼考殘留物色譜圖
圖1 添加水平為1 mg/kg草魚肉中氟苯尼考殘留物色譜圖
