水產品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
（Copure ® HLB）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC作為分析方法，檢測水產品樣品中的喹乙醇的殘留水平。該 方法操作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
喹乙醇(CAS:23696-28-8)。
三、應用范圍
本方法適用于水產品中喹乙醇的檢測的HPLC檢測及確證。
四、參考標準
《GB/T 8381.7-2009 飼料中喹乙醇的測定 高效液相色譜法》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ® HLB固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COHLB360)。
六、實驗方法
1、樣品提取
準確稱取5 g勻漿魚肉試樣(精確到0.001 g)于50 mL具塞塑料離心管中，加入35 mL甲醇-水溶液(5:95, v/v)，離 心管置入搖床中，室溫下恒溫振蕩器振蕩速度110 r/min，避光振蕩45 min。提取液在3500 r/min下離心10 min，上清液經濾紙過濾，濾液加入10 mL正己烷，充分混勻后，以5000 r/min離心10 min，棄取上層溶液，下 層溶液待凈化。
2、SPE柱凈化
(1)活化：HLB固相萃取柱使用前依次使用3 mL甲醇和3 mL水活化。
(2)上樣和洗脫：將待凈化液的樣品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速過柱，棄去濾液。依 次用3 mL 0.02 mol/L 鹽酸溶液、0.1 mol/L鹽酸溶液、甲醇-水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液， 用吸耳球吹出小柱中殘留液。用5 mL甲醇洗脫固相萃取柱，收集洗脫液。 (3)重新溶解：洗脫液于40 ℃氮吹吹干，用2 mL甲醇定容，0.22 μm微孔濾膜過濾，供HPLC上機測試。
3、HPLC條件 設備：Waters Alliance 2695
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm) 檢測器：Waters 2487 紫外檢測器 檢測波長：380 nm
流動相：A：甲醇 B：0.1mol/L甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
流速：1 mL/min
進樣體積：20 μL
七、實驗結果
1、魚肉基質中喹乙醇的2mg/kg添加回收結果
表2 魚肉基質中喹乙醇的2mg/kg添加回收結果
2、添加水平為2mg/kg魚肉中喹乙醇檢測色譜圖
圖1 添加水平為2mg/kg魚肉中喹乙醇檢測色譜圖
（Copure ® HLB）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC作為分析方法，檢測水產品樣品中的喹乙醇的殘留水平。該 方法操作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
喹乙醇(CAS:23696-28-8)。
三、應用范圍
本方法適用于水產品中喹乙醇的檢測的HPLC檢測及確證。
四、參考標準
《GB/T 8381.7-2009 飼料中喹乙醇的測定 高效液相色譜法》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ® HLB固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COHLB360)。
六、實驗方法
1、樣品提取
準確稱取5 g勻漿魚肉試樣(精確到0.001 g)于50 mL具塞塑料離心管中，加入35 mL甲醇-水溶液(5:95, v/v)，離 心管置入搖床中，室溫下恒溫振蕩器振蕩速度110 r/min，避光振蕩45 min。提取液在3500 r/min下離心10 min，上清液經濾紙過濾，濾液加入10 mL正己烷，充分混勻后，以5000 r/min離心10 min，棄取上層溶液，下 層溶液待凈化。
2、SPE柱凈化
(1)活化：HLB固相萃取柱使用前依次使用3 mL甲醇和3 mL水活化。
(2)上樣和洗脫：將待凈化液的樣品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速過柱，棄去濾液。依 次用3 mL 0.02 mol/L 鹽酸溶液、0.1 mol/L鹽酸溶液、甲醇-水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液， 用吸耳球吹出小柱中殘留液。用5 mL甲醇洗脫固相萃取柱，收集洗脫液。 (3)重新溶解：洗脫液于40 ℃氮吹吹干，用2 mL甲醇定容，0.22 μm微孔濾膜過濾，供HPLC上機測試。
3、HPLC條件 設備：Waters Alliance 2695
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm) 檢測器：Waters 2487 紫外檢測器 檢測波長：380 nm
流動相：A：甲醇 B：0.1mol/L甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
流速：1 mL/min
進樣體積：20 μL
七、實驗結果
1、魚肉基質中喹乙醇的2mg/kg添加回收結果
表2 魚肉基質中喹乙醇的2mg/kg添加回收結果
2、添加水平為2mg/kg魚肉中喹乙醇檢測色譜圖
圖1 添加水平為2mg/kg魚肉中喹乙醇檢測色譜圖
