咸鴨蛋中蘇丹紅染料的檢測方法
（Copure ® 蘇丹紅檢測柱）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測咸鴨蛋中蘇丹紅的含量。該方法 可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗目標物
蘇丹紅Ⅰ(CAS:842-07-9)，蘇丹紅Ⅱ(CAS:3118-97-6)，蘇丹紅Ⅲ(CAS:85-86-9)，蘇丹紅Ⅳ(CAS:85- 83-6)。
三、應用范圍
本方法適用于鮮咸鴨蛋中蘇丹紅的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
biocomma ® Copure ® 蘇丹紅檢測柱500mg/6mL(Cat.No.COSD6500)。
五、實驗步驟
1、樣品提取
準確稱取咸鴨蛋黃1.0 g加入6 mL 正己烷，渦旋1 min，振蕩5 min， 超聲處理5 min，4000 r/min離心5 min， 取正己烷層液備用。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：蘇丹紅檢測柱使用前用10 mL正己烷活化。
(2) 上樣和洗脫：在蘇丹紅檢測柱上加入待凈化液，棄去流出液，然后用5 mL正己烷淋洗，棄去淋洗液，抽干
小柱。用60 mL 5%丙酮正己烷洗脫，收集洗脫液。（整個上樣洗脫過程保持流速1 mL/min)。
(3) 重新溶解：洗脫液40 ℃氮吹至近干，加1 mL 40%甲基叔丁基醚甲醇溶液定容，過0.45 μm 濾膜，待上機
測試。
3、HPLC條件
設 備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5 μm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相：A：乙腈
B：0.2%甲酸水溶液
洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
流速：1.0 mL/min
檢測波長：478nm 、520 nm
進樣體積: 20 μL
六、實驗結果
1、1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果
表2 1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果
2、添加水平為1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖
（Copure ® 蘇丹紅檢測柱）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測咸鴨蛋中蘇丹紅的含量。該方法 可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗目標物
蘇丹紅Ⅰ(CAS:842-07-9)，蘇丹紅Ⅱ(CAS:3118-97-6)，蘇丹紅Ⅲ(CAS:85-86-9)，蘇丹紅Ⅳ(CAS:85- 83-6)。
三、應用范圍
本方法適用于鮮咸鴨蛋中蘇丹紅的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
biocomma ® Copure ® 蘇丹紅檢測柱500mg/6mL(Cat.No.COSD6500)。
五、實驗步驟
1、樣品提取
準確稱取咸鴨蛋黃1.0 g加入6 mL 正己烷，渦旋1 min，振蕩5 min， 超聲處理5 min，4000 r/min離心5 min， 取正己烷層液備用。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：蘇丹紅檢測柱使用前用10 mL正己烷活化。
(2) 上樣和洗脫：在蘇丹紅檢測柱上加入待凈化液，棄去流出液，然后用5 mL正己烷淋洗，棄去淋洗液，抽干
小柱。用60 mL 5%丙酮正己烷洗脫，收集洗脫液。（整個上樣洗脫過程保持流速1 mL/min)。
(3) 重新溶解：洗脫液40 ℃氮吹至近干，加1 mL 40%甲基叔丁基醚甲醇溶液定容，過0.45 μm 濾膜，待上機
測試。
3、HPLC條件
設 備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5 μm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相：A：乙腈
B：0.2%甲酸水溶液
洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
流速：1.0 mL/min
檢測波長：478nm 、520 nm
進樣體積: 20 μL
六、實驗結果
1、1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果
表2 1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果
2、添加水平為1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為1 mg/kg咸鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖
