飲料中合成著色劑檢測的固相萃取方法
（Copure ® 聚酰胺小柱）
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br />本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測飲料中合成著色劑的含量。該方 法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
檸檬黃(CAS:1934-21-0)，日落黃(CAS:2783-94-0)，胭脂紅(CAS:569-64-2)，亮藍(lán)(CAS:3844-45- 9)。
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于飲料中多種合成著色劑的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實(shí)驗(yàn)材料
biocomma ® Copure ® 聚酰胺小柱500mg/3mL(Cat. No. COPACR36)。
五、實(shí)驗(yàn)步驟
1、樣品提取
準(zhǔn)確稱取混有果肉的飲料5.0 g于15 mL離心管中，超聲波振蕩提取5 min， 渦旋1 min，4000 r/min離心5 min，上清液轉(zhuǎn)移至15 mL離心管中，用水定容至5 mL。
2、SPE柱活化
(1) 活化：聚酰胺小柱使用前用2 mL甲醇、2 mL水活化 。
(2) 上樣和洗脫：在聚酰胺小柱上加入5 mL待凈化樣品，然后用2 mL水、2 mL甲醇-甲酸（7:3,v/v）淋洗。然
后用5 mL 5%氨化甲醇進(jìn)行洗脫，控制流速1 mL/min，收集洗脫液。
(3) 重新溶解：洗脫液于40℃氮吹至干，加1 mL水定容，混勻，過0.45 μm濾膜，待上機(jī)測試。
3、HPLC條件
設(shè) 備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5 μm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相：A：甲醇 B：0.02mol/L乙酸銨緩沖溶液
洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
流速：1.0 mL/min
檢測波長：509 nm
進(jìn)樣體積：20 μL
六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、5 mg/kg飲料中4種合成著色劑的添加回收結(jié)果
表2 5 mg/kg飲料中4中合成著色劑的添加回收結(jié)果
2、添加水平為5 mg/kg飲料中4種合成著色劑檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為5 mg/kg飲料中4種合成著色劑檢測的液相色譜圖
（Copure ® 聚酰胺小柱）
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br />本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測飲料中合成著色劑的含量。該方 法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
檸檬黃(CAS:1934-21-0)，日落黃(CAS:2783-94-0)，胭脂紅(CAS:569-64-2)，亮藍(lán)(CAS:3844-45- 9)。
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于飲料中多種合成著色劑的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實(shí)驗(yàn)材料
biocomma ® Copure ® 聚酰胺小柱500mg/3mL(Cat. No. COPACR36)。
五、實(shí)驗(yàn)步驟
1、樣品提取
準(zhǔn)確稱取混有果肉的飲料5.0 g于15 mL離心管中，超聲波振蕩提取5 min， 渦旋1 min，4000 r/min離心5 min，上清液轉(zhuǎn)移至15 mL離心管中，用水定容至5 mL。
2、SPE柱活化
(1) 活化：聚酰胺小柱使用前用2 mL甲醇、2 mL水活化 。
(2) 上樣和洗脫：在聚酰胺小柱上加入5 mL待凈化樣品，然后用2 mL水、2 mL甲醇-甲酸（7:3,v/v）淋洗。然
后用5 mL 5%氨化甲醇進(jìn)行洗脫，控制流速1 mL/min，收集洗脫液。
(3) 重新溶解：洗脫液于40℃氮吹至干，加1 mL水定容，混勻，過0.45 μm濾膜，待上機(jī)測試。
3、HPLC條件
設(shè) 備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5 μm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相：A：甲醇 B：0.02mol/L乙酸銨緩沖溶液
洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
流速：1.0 mL/min
檢測波長：509 nm
進(jìn)樣體積：20 μL
六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、5 mg/kg飲料中4種合成著色劑的添加回收結(jié)果
表2 5 mg/kg飲料中4中合成著色劑的添加回收結(jié)果
2、添加水平為5 mg/kg飲料中4種合成著色劑檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為5 mg/kg飲料中4種合成著色劑檢測的液相色譜圖
