玉米赤霉烯酮(Zearalenone)又稱F-2毒素,它首先從有赤霉病的玉米中分離得到。玉米赤霉烯酮其產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬(Fusarium)的菌侏,如禾谷鐮刀菌(F.graminearum)和三線鐮刀菌(F.tricinctum)、黃色鐮孢(Fusarium culmorum)、木賊鐮孢(Fusarium equiseti)、半裸鐮孢(Fusarium sernitectum)、茄病鐮孢(Fusarium solani)等菌種。鐮孢菌屬種在玉米繁殖一般需要22%~25%的濕度。
危害:妊娠期的動(dòng)物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流產(chǎn)、死胎和畸胎。食用含赤霉病麥面粉制作的各種面食也可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中毒癥狀,如惡心、發(fā)冷、頭痛、神智抑郁和共濟(jì)失調(diào)等。
檢測(cè)方法:1.液相和氣相色譜的方法進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定的方法較為復(fù)雜,對(duì)儀器的要求也很高,但結(jié)果很準(zhǔn)確。還有的是從分子生物學(xué)的角度進(jìn)行分析,測(cè)定的范圍在5-100μg/mL。但目前也探索出一套可供實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)易測(cè)定的方法。稱取10g樣品,先用10mL1mol/L的鹽酸酸化,然后用100mL氯仿萃取30min(可放在振蕩器上振蕩),靜置后過(guò)濾。取氯仿液20mL,用1mol/L氫氧化鈉50mL進(jìn)行反提取兩次。將提取液濃縮至20mL左右,再用氯仿液50mL萃取兩次。濃縮至2mL左右使用硅膠60板,用氯仿一丙酮(2:98或4:96)作為展開劑,在紫外燈下觀察亮點(diǎn)。如出現(xiàn)藍(lán)色熒光,即含有玉米赤霉烯酮。
2.酶聯(lián)免疫法:
測(cè)定原理:玉米赤霉烯酮檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法檢測(cè)尿樣和組織等樣本中的玉米赤霉烯酮,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來(lái)進(jìn)行,樣本中的玉米赤霉烯酮和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)標(biāo)記有辣根過(guò)氧化酶的抗玉米赤霉烯酮抗體,通過(guò)洗滌后,用TMB底物顯色,樣品中的玉米赤霉烯酮含量與樣品的吸光度值呈反比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出玉米赤霉烯酮含量。
3.膠體金檢測(cè)法:
檢測(cè)原理:應(yīng)用膠體金法免疫層析技術(shù),以條狀纖維層析材料為固相,通過(guò)毛細(xì)作用使樣品溶液到達(dá)指定位置反應(yīng)、顯色來(lái)檢測(cè)樣品中ZON的含量。檢測(cè)時(shí),樣品中的ZON與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,抑制抗體與檢測(cè)線(T線)上的ZON-BSA偶聯(lián)物之間的結(jié)合,導(dǎo)致T線顏色變化,通過(guò)T線顏色的有無(wú)來(lái)判斷ZON是否超標(biāo)。如果樣品中ZON的含量等于或高于檢測(cè)限,在規(guī)定的檢測(cè)時(shí)間內(nèi),T線不顯色,結(jié)果為陽(yáng)性;反之,T線顯色,則樣品中ZON的含量低于檢測(cè)限,結(jié)果為陰性。無(wú)論樣品中ZON的含量高低,質(zhì)控線(C線)均顯色,以示檢測(cè)有效。
危害:妊娠期的動(dòng)物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流產(chǎn)、死胎和畸胎。食用含赤霉病麥面粉制作的各種面食也可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中毒癥狀,如惡心、發(fā)冷、頭痛、神智抑郁和共濟(jì)失調(diào)等。
檢測(cè)方法:1.液相和氣相色譜的方法進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定的方法較為復(fù)雜,對(duì)儀器的要求也很高,但結(jié)果很準(zhǔn)確。還有的是從分子生物學(xué)的角度進(jìn)行分析,測(cè)定的范圍在5-100μg/mL。但目前也探索出一套可供實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)易測(cè)定的方法。稱取10g樣品,先用10mL1mol/L的鹽酸酸化,然后用100mL氯仿萃取30min(可放在振蕩器上振蕩),靜置后過(guò)濾。取氯仿液20mL,用1mol/L氫氧化鈉50mL進(jìn)行反提取兩次。將提取液濃縮至20mL左右,再用氯仿液50mL萃取兩次。濃縮至2mL左右使用硅膠60板,用氯仿一丙酮(2:98或4:96)作為展開劑,在紫外燈下觀察亮點(diǎn)。如出現(xiàn)藍(lán)色熒光,即含有玉米赤霉烯酮。
2.酶聯(lián)免疫法:
測(cè)定原理:玉米赤霉烯酮檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法檢測(cè)尿樣和組織等樣本中的玉米赤霉烯酮,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來(lái)進(jìn)行,樣本中的玉米赤霉烯酮和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)標(biāo)記有辣根過(guò)氧化酶的抗玉米赤霉烯酮抗體,通過(guò)洗滌后,用TMB底物顯色,樣品中的玉米赤霉烯酮含量與樣品的吸光度值呈反比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出玉米赤霉烯酮含量。
3.膠體金檢測(cè)法:
檢測(cè)原理:應(yīng)用膠體金法免疫層析技術(shù),以條狀纖維層析材料為固相,通過(guò)毛細(xì)作用使樣品溶液到達(dá)指定位置反應(yīng)、顯色來(lái)檢測(cè)樣品中ZON的含量。檢測(cè)時(shí),樣品中的ZON與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,抑制抗體與檢測(cè)線(T線)上的ZON-BSA偶聯(lián)物之間的結(jié)合,導(dǎo)致T線顏色變化,通過(guò)T線顏色的有無(wú)來(lái)判斷ZON是否超標(biāo)。如果樣品中ZON的含量等于或高于檢測(cè)限,在規(guī)定的檢測(cè)時(shí)間內(nèi),T線不顯色,結(jié)果為陽(yáng)性;反之,T線顯色,則樣品中ZON的含量低于檢測(cè)限,結(jié)果為陰性。無(wú)論樣品中ZON的含量高低,質(zhì)控線(C線)均顯色,以示檢測(cè)有效。