細胞培養基本操作

1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射 30-60 分鐘滅菌，以 75% 乙醇擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉 10 分鐘后，再開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同也不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以 75% 乙醇擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉 10 分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作。

2. 無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞。必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流流通。實驗用品用75% 乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面之內無菌區域，勿在邊緣非無菌區域操作。

3. 小心取用無菌實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約 45°取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

4. 工作人員應注意自身安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染細胞株應特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺（至少Class II）。操作過程中，小心毒性藥品，例如 DMSO 及 TPA 等，并避免尖銳針頭傷害等。

5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO₂ 鋼瓶中 CO₂ 壓力。

5.2. CO₂ 培養箱：CO₂ 濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水，每周更換）。

5.3. 定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000 小時/HEPA）。

6. 水槽可添加消毒劑（新潔爾滅 1:750），定期更換水槽的水。