近日，中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所畜產品質量安全控制與溯源創新團隊提出了一種基于核酸免擴增的分子雜交試紙條定量分析策略，成功實現了對乳品成分的準確定量檢測。相關研究成果發表在《生物傳感與生物電子（Biosensors and Bioelectrnics）》。
摻假和欺詐行為的嚴重程度將直接影響企業的非法所得，摻假的嚴重程度是法律量刑時考慮的重要因素。核酸因其良好的特異性和熱穩定性，在加工乳制品的檢測中應用廣泛。然而，基于核酸擴增的檢測方法多為定性檢測，且操作繁瑣，難以實現準確的定量分析。
該研究創新性地提出了一種基于膠體金側流層析試紙條的免核酸擴增乳品成分定量檢測方法。以乳品中含量豐富、穩定且種屬特異的線粒體DNA作為檢測靶標，設計單鏈DNA探針與其雜交。研究團隊開發了一種類環介導等溫擴增的方法，通過 Bst 酶的解旋和DNA聚合功能，結合雜交緩沖液，實現了靶標DNA雙鏈的解旋和探針與靶標DNA單鏈的高效雜交，最大程度地減少了靶標互補鏈與DNA探針之間的競爭，有效克服了靶標DNA鏈互補鏈對檢測的影響，提高了雜交的特異性和效率。同時，該方法能夠有效的避免氣溶膠污染的風險，并可實現對乳品的準確定量檢測。該技術能夠檢測到乳品中低至1%（v/v）含量的牛奶，結合便攜式試紙條掃描儀使用時，能夠精確分析牛奶含量。這種無需擴增的核酸檢測方法為乳品行業提供了一種高效且準確的乳品成分定量檢測手段，為確保乳品質量和真偽提供了可靠的技術支持。
該研究得到了國家重點研發計劃、中國農業科學院科技創新工程等項目的支持。
原文鏈接：https://doi.org/10.1016/j.bios.2024.116140
日期：2024-07-10
摻假和欺詐行為的嚴重程度將直接影響企業的非法所得，摻假的嚴重程度是法律量刑時考慮的重要因素。核酸因其良好的特異性和熱穩定性，在加工乳制品的檢測中應用廣泛。然而，基于核酸擴增的檢測方法多為定性檢測，且操作繁瑣，難以實現準確的定量分析。
該研究創新性地提出了一種基于膠體金側流層析試紙條的免核酸擴增乳品成分定量檢測方法。以乳品中含量豐富、穩定且種屬特異的線粒體DNA作為檢測靶標，設計單鏈DNA探針與其雜交。研究團隊開發了一種類環介導等溫擴增的方法，通過 Bst 酶的解旋和DNA聚合功能，結合雜交緩沖液，實現了靶標DNA雙鏈的解旋和探針與靶標DNA單鏈的高效雜交，最大程度地減少了靶標互補鏈與DNA探針之間的競爭，有效克服了靶標DNA鏈互補鏈對檢測的影響，提高了雜交的特異性和效率。同時，該方法能夠有效的避免氣溶膠污染的風險，并可實現對乳品的準確定量檢測。該技術能夠檢測到乳品中低至1%（v/v）含量的牛奶，結合便攜式試紙條掃描儀使用時，能夠精確分析牛奶含量。這種無需擴增的核酸檢測方法為乳品行業提供了一種高效且準確的乳品成分定量檢測手段，為確保乳品質量和真偽提供了可靠的技術支持。
該研究得到了國家重點研發計劃、中國農業科學院科技創新工程等項目的支持。
原文鏈接：https://doi.org/10.1016/j.bios.2024.116140
日期：2024-07-10
