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公司基本資料信息
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貨號:CY011 MEM-EGFP穩(wěn)定表達(dá)293細(xì)胞株表達(dá)人GAP43基因(GeneID:2596)N端20 AA信號肽和EGFP的融合蛋白,定位于細(xì)胞膜。該細(xì)胞株的細(xì)胞膜發(fā)出綠色熒光,可用于細(xì)胞膜定位相關(guān)實(shí)驗(yàn)或者細(xì)胞膜定位基因的研究。 | ![]() |
細(xì)胞特性:
細(xì)胞來源:HEK293V細(xì)胞(人胚腎細(xì)胞)
表達(dá)蛋白:細(xì)胞膜定位EGFP蛋白
構(gòu)建載體:pLV-MEM-EGFP(貨號VL3501)
篩選抗生素:嘌呤霉素
培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
為保持細(xì)胞良好的狀態(tài),HEK293V細(xì)胞密度達(dá)50%時(shí)就需要傳代。由于細(xì)胞生長迅速,一般2-3天需傳代一次。
注意:及時(shí)傳代對保持細(xì)胞狀態(tài)極為重要。
以25cm培養(yǎng)瓶傳代為例。
1、傳代前將細(xì)胞培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶溫浴到37℃。
2、吸去細(xì)胞培養(yǎng)液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶,使胰蛋白酶均勻覆蓋細(xì)胞。吸去胰蛋白酶,將培養(yǎng)瓶放置在細(xì)胞培養(yǎng)箱中,37攝氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差別,消化時(shí)間可用30秒到1分鐘。應(yīng)在倒置顯微鏡下觀察,看到細(xì)胞分開及稍微變圓即可。
5、加入5ml 細(xì)胞培養(yǎng)基,用吸管輕柔吹打分散細(xì)胞。
6、按1:4到1:5接種細(xì)胞。
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