乳制品的脂肪含量不僅影響其口感與風味,更是衡量品質的關鍵指標。不同乳制品因脂肪含量特性不同,適用的檢測方法也各有差異。
原料乳脂肪含量受奶牛品種、飼養條件等影響,一般在 3% - 5%。例如,荷斯坦奶牛產奶脂肪含量多在 3.2% - 3.8% ,娟姍牛產奶脂肪含量相對較高,可達 4% - 5%。
蓋勃法:在乳樣中加入硫酸,破壞乳的膠體性狀與脂肪球膜,使非脂成分溶解,脂肪游離,經加熱離心,脂肪聚集于乳脂計刻度處,讀取脂肪百分含量。此方法簡便快速,廣泛應用于鮮乳脂肪檢測。
羅茲 - 哥特里法:利用氨 - 乙醇溶液破壞乳的膠體性狀與脂肪球膜,使脂肪游離,再用乙醚 - 石油醚提取,蒸餾除溶劑后稱量得脂肪含量。這是國際常用標準方法,適用于各類液狀乳。
(三)注意事項
蓋勃法:硫酸濃度與用量需精準,沿管壁緩慢注入防局部過熱炭化脂肪;嚴格控制加熱與離心條件,讀數時視線與乳脂計刻度平行。
羅茲 - 哥特里法:所用乙醚、石油醚應無水、無醇、無過氧化物;提取時防止溶劑揮發,蒸餾除溶劑溫度不宜高,防脂肪氧化致結果不準。
全脂滅菌乳:保留原料乳脂肪含量,通常在 3% - 5%。
低脂滅菌乳:脂肪含量降低至 1% - 2%。
脫脂滅菌乳:脂肪含量不超 0.5%。
(二)檢測方法滅菌乳同樣適用蓋勃法和羅茲 - 哥特里法,原理與原料乳檢測一致。
與原料乳檢測時采用這兩種方法的注意事項相同,確保操作精準,保障結果準確。
奶油脂肪含量較高,一般在 80% - 85%。稀奶油脂肪含量在 10% - 50%,常用于甜點制作等。稀奶油的國標脂肪含量為 10.0%—80.0%。
酸水解法:先對奶油結合脂肪水解使其游離,經鹽酸溶液水解后用乙醚提取,蒸去乙醚稱量殘留物計算脂肪含量,適用于多種食品脂肪檢測。
巴布科克法:加硫酸破壞奶油酪蛋白鈣鹽與脂肪球膜,使脂肪游離,離心加熱后讀取脂肪層刻度數得脂肪含量,常用于乳制品工業檢測奶油脂肪。
(三)注意事項酸水解法:保證鹽酸濃度與水解時間,使脂肪充分游離;冷卻速度適中,避免脂肪重凝;注意乙醚萃取次數與通風,揮發乙醚時遠離明火。
巴布科克法:使用純凈合適濃度硫酸,加硫酸時邊加邊搖;按規定轉速與時間離心;讀數注意溫度校正。
不同種類差異大,軟質奶酪脂肪含量一般在 20% - 30% ,如卡門貝爾奶酪約 25%;半硬質奶酪脂肪含量在 30% - 40% ,像高達奶酪約 35%;硬質奶酪脂肪含量可達 40% - 50% ,例如帕爾瑪干酪約 45%。
索氏抽提法:用無水乙醚或石油醚在索氏提取器中反復萃取奶酪樣品,回收溶劑后稱量提取物計算脂肪含量,適用于脂類高、結合態脂類少、易烘干磨細的樣品。
核磁共振法(NMR):利用脂肪氫原子核在磁場中的共振特性,通過信號強度與脂肪含量相關性快速測定,具有無損、快速等優點,適用于在線與大量樣品檢測。
(三)注意事項索氏抽提法:樣品充分研磨粉碎,選合適溶劑,保證提取時間,揮發干凈溶劑,稱量至恒重。
核磁共振法:定期校準儀器,確保樣品均勻,避免外界磁場干擾。
一、儀器設備·溶液試劑
儀器設備:
分析天平、離心機、電熱鼓風干燥箱、恒溫水浴鍋、干燥器、抽脂瓶
溶液試劑:
(1)氨水(NH3·H2O):質量分數約25%;
(2)剛果紅:將1g剛果紅溶于水,稀釋到100mL;
(3)乙醇:體積分數至少為95%;
(4)無水乙醚(不含過氧化物);
(5)石油醚(30~60℃沸騰);
(6)鹽酸溶液(6mol/L):量取50mL鹽酸緩慢倒入40mL水中,定容至100mL,混勻。
(7)碘溶液(0.1mol/L):稱取碘12.7g和碘化鉀25g,于水中溶解并定容至1L。
二、分析步驟
1.脂肪收集瓶的準備
于干燥的脂肪收集瓶中加入幾粒沸石,放入烘箱中干燥1h。使脂肪收集瓶冷卻至室溫,稱量,精確至0.1 mg。
2.試樣堿水解
(1)稱取充分混勻試樣10g(精確至0.0001g)于抽脂瓶中。
(2)加入2.0mL 氨水。
(3)充分混合后立即將抽脂瓶放入65 ℃±5 ℃的水浴中,加熱15 min~20min,不時取出振蕩。取出后,冷卻至室溫,靜置30s。
3.抽提
(1)加入10 mL乙醇,緩和但徹底地進行混合,避免液體太接近瓶頸。
乙醇作用:沉淀蛋白質防止乳化
(2)如果需要,可加入兩滴剛果紅溶液。空白試驗與樣品檢驗同時進行,使用相同步驟和相同試劑,但用10mL水代替試樣。
(3)加入25mL乙醚,加塞輕輕搖勻。小心放出氣體,再塞緊,按約100次/min振搖1min, 小心開塞并放出氣體,用少量的混合溶劑沖洗塞子和瓶頸,使沖洗液流入抽脂瓶。
(應注意避免形成持久乳化液)
(4)加入 25 mL 石油醚,塞上重新潤濕的塞子,輕輕振蕩30s。
(5)小心開塞并放出氣體,在500r/min~600r/min下離心5min,或靜止至少30min,直到上層液澄清,并明顯與水相分離。
小心地打開瓶塞,用少量的混合溶劑沖洗塞子和瓶頸內壁,使沖洗液流入抽脂瓶。如果兩相界面低于小球與瓶身相接處,則沿瓶壁邊緣慢慢地加入水,使液面高于小球和瓶身相接處 [見圖1a)],以便于傾倒。
(6)將上層液盡可能地倒入已準備好的加入沸石的脂肪收集瓶中。
(7)避免倒出水層[見圖1b)],用少量混合溶劑(等體積混合乙醚和石油醚,現用現配)沖洗瓶頸外部,沖洗液收集在脂肪收集瓶中。要防止溶劑濺到抽脂瓶的外面。
(8)向抽脂瓶中加入5mL乙醇,用乙醇沖洗瓶頸內壁,緩和但徹底地進行混合。重復提取抽脂瓶中的殘留液2次,每次乙醚、石油醚用量各為15mL。
(9)重復(3)~(7),用15mL無水乙醚和15mL石油醚,進行第3次抽提。
4.回收溶劑、烘干、稱重
(1)合并所有提取液,可采用蒸餾的方法除去脂肪收集瓶中的溶劑,也可于沸水浴上蒸發至干來除掉溶劑。蒸前用少量混合溶劑沖洗瓶頸內部。
(2)將脂肪收集瓶放入100℃±5℃的烘箱中加熱1h。
(3)取出脂肪收集瓶,冷卻至室溫,稱量,精確至0.1mg。
(4)重復干燥直到脂肪收集瓶兩次連續稱量差值不超過2mg,記錄脂肪收集瓶和抽提物的最低質量。
三.分析結果表述
樣品中脂肪含量按下式計算:
式中,X ——樣品中脂肪含量,g/100g;
m ——樣品的質量,g;
m1 ——脂肪收集瓶和抽提物的質量,g;
m2 ——脂肪收集瓶的質量, g;
m3 ——空白試驗中,脂肪收集瓶和抽提物的質量,g;
m4 ——空白試驗中脂肪收集瓶的質量,g;
100 ——換算系數。
四.精密度
結果保留3位有效數字。
當樣品中脂肪含量≥15%時,兩次獨立測定結果之差≤0.3g/100g;
當樣品中脂肪含量在5%~15%時,兩次獨立測定結果之差≤0.2g/100g;
當樣品中脂肪含量≤5%時,兩次獨立測定結果之差≤0.1g/100g。