動物源性食品中氯霉素檢測的固相萃取方法（Copure® C18）一、實驗?zāi)康谋狙芯坷霉滔噍腿》ㄗ鳛闃悠返那疤幚矸椒ǎ琇C-MS/MS法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗?zāi)繕?biāo)物氯霉素(CAS:56-75-7)。
三、應(yīng)用范圍本方法適用于動物源性食品中氯霉素的LC-MS/MS檢測及確證。
四、參考標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 22338-2008動物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測定》。
五、實驗材料Biocomma Copure TM C18固相萃取柱1000mg/6mL(Cat.No.COC1861000)。
六、實驗方法1、樣品提取將稱取5 g豬肉試樣，精確到0.01 g。置于50 mL離心管中，加入5 mL水，于渦旋混合器上快速混合1 min，使試樣完全溶解。準(zhǔn)確加入15 mL乙酸乙酯，在振蕩器上振蕩10 min，以3000 r/min離心10 min，準(zhǔn)確吸取上層乙酸乙酯12 mL轉(zhuǎn)入15 mL的離心管中，置于濃縮吹氮儀在45 ℃吹掃蒸干，加入5 mL水溶解，待凈化。
2、SPE柱凈化(1)活化：依次采用5 mL甲醇、5 mL水活化C18固相萃取柱。(2)凈化：將提取液過C18固相萃取柱，待溶液完全流出后，用2×3 mL水過柱，然后再用5 mL乙腈:水(2:8,v/v)淋洗柱，棄去全部淋出液。用真空泵減壓抽干10 min。(3)洗脫：用6 mL乙酸乙酯洗脫，收集洗脫液于10 mL離心管中，于45 ℃用氮?dú)獯蹈梢捍蹈桑靡译?水(2:8,v/v)定容至1 mL，供LC-MS/MS上機(jī)測定。
3、LC-MS/MS條件色譜柱：Venusil ASB C18(2.1×150 mm，5 μm)質(zhì)譜儀：API 4000流動相：A: 10 mmol/L乙酸銨溶液 B: 甲醇流速：0.2 mL/min柱溫：40 ℃進(jìn)樣體積:5μL離子源：電噴霧(ESI)，負(fù)離子模式檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)表1 質(zhì)譜儀離子源參數(shù)
表2 氯霉素及內(nèi)標(biāo)的母離子和子離子參數(shù)表
七、實驗結(jié)果1、2μg/kg豬肉基質(zhì)氯霉素添加回收結(jié)果表3 2μg/kg豬肉基質(zhì)氯霉素添加回收結(jié)果
2、添加水平為2μg/kg豬肉基質(zhì)中氯霉素檢測色譜圖圖1 氯霉素及內(nèi)標(biāo)氯霉素-D5總離子流圖
圖2 氯霉素(CAP)(320.9/151.9)質(zhì)譜圖
圖3 氯霉素-D5(CAP-D5)(326.1/157.0)質(zhì)譜圖
