豬瘦肉中對乙酰氨基酚的固相萃取方法
（Copure®對乙酰氨基酚檢測柱）
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測豬瘦肉中對乙酰氨基酚的含量。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
對乙酰氨基酚(CAS:103-90-2)。
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于肉制品中對乙酰氨基酚檢測的HPLC檢測及確證。
四、實(shí)驗(yàn)材料
biocomma® Copure® 對乙酰氨基酚檢測柱。
五、實(shí)驗(yàn)步驟
1、樣品提取
準(zhǔn)確稱取豬瘦肉2.0g，加入10mL乙酸乙酯，震蕩、渦旋2min，4000r/min離心5min取乙酸乙酯層；向豬肉中再加入乙酸乙酯10mL重復(fù)提取一次；合并乙酸乙酯提取液，于50℃氮吹至近干，6mL水溶解，正己烷5 mL×2次除脂，棄去正己烷，水層備用。
2、SPE柱凈化
(1)活化：對乙酰氨基酚專用柱使用前用5mL甲醇、5mL水活化。
(2)上樣和洗脫：將提取備用液過柱，棄去流出液，加入5 mL 5 %甲醇水溶液淋洗，棄去淋洗液，抽干小柱；加
入8mL甲醇洗脫，收集洗脫液（上樣、洗脫過程保持流速1mL/min）。
(3)重新溶解：洗脫液在40℃下氮吹至近干，1mL甲醇定容，0.22μm濾膜過濾，濾液待上機(jī)測試。
3、HPLC條件
設(shè)備： Waters Alliance 2695
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
檢測器：Waters 2487 紫外檢測器
檢測波長：250 nm
等度洗脫：A：乙腈B：0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液（pH=2.3）
洗脫方式：等度洗脫，A：B=5：95
流速：1.0 mL/min
進(jìn)樣體積：20μL
六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、1.0mg/kg豬瘦肉基質(zhì)中對乙酰氨基酚的添加回收結(jié)果
表11.0mg/kg豬瘦肉基質(zhì)中對乙酰氨基酚的添加回收結(jié)果
2、添加水平為1.0mg/kg對乙酰氨基酚檢測的液相色譜圖
圖1添加水平為1.0mg/kg對乙酰氨基酚檢測的液相色譜圖
