關鍵詞：細胞培養 細胞污染 細胞空泡化
將獲得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養，則直接將組織塊接入培養器皿底部，幾個小時后組織塊可貼牢在底部，再參加培養基。如系細胞培養，一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數，按要求以必定的量（以每毫升細胞數表示）接入培養器皿并直接參加培養基。細胞進入培養器皿后，立即放入培養箱中，使細胞盡早進入成長狀態。
細胞空泡化是什么
變性細胞的胞質、胞核內出現大小不一的空泡(水泡)，細胞呈蜂窩狀或網狀的現象。變性嚴重者，小水泡相互融合成大水泡，細胞核懸于中央，或被擠于一側，細胞形體顯著腫大，胞質空白，外形如氣球狀。
胞質空泡化可以是可逆的，也可以是不可逆的。可逆的胞質空泡化通常只是在暴露于誘導劑后能觀察到，這種胞質空泡化可以引起細胞狀態的改變或者細胞周期停滯。而不可逆的胞質空泡化會導致細胞死亡，許多自然或者人工合成的化合物以及被細菌或者病毒感染后均會出現不可逆的胞質空泡化，因此出現這種情況，細胞便不可再用于后續的實驗中。
出現細胞空泡化的原因
1）細胞老化
原代細胞培養的過程中經常出現這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。
2）PH值
培養液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大。
3）胰酶消化
胰酶消化時間過長，會導致細胞狀態受損，有時也會出現這種情況。除此之外，如果消化細胞吹打時力度過大，產生太多氣泡，長期存在也會出現這種現象。
4）自噬
細胞缺乏營養導致饑餓誘導形成自噬也會形成空泡化，但是這種空泡在光學顯微鏡下是看不到的，只有在電鏡下才能觀察到。
5）細胞代謝
在細胞培養過程中，由于血清濃度不夠、藥物作用、外界刺激等情況下導致細胞代謝出現問題，內質網應激狀況下會出現細胞空泡化的情況。
6）污染
衣原體感染：一旦一些細胞出現空泡化，繼續培養，空泡范圍會擴大，即使傳代后也如此，出現這種情況，細胞基本無法挽救。后來檢測發現，此種細胞存在支/衣原體的感染。
細胞空泡化我們應該如何解決？
1）如果是因為細胞老化的原因，可以通過復蘇代數靠前的細胞進行培養。
2）如果是培養液PH的問題，可以通過更換培養液調整到合適的PH值，再進行培養。
3）在傳代時，要選用合適濃度的胰酶和選取適當的消化時間進行消化，在操作時避免吹打太過用力出現太多氣泡。
4）要保證細胞培養所需的營養充足，可以通過增加血清濃度和在培養基中加入谷氨酰氨解決。
5）盡量使用質量好和渠道正規的胎牛血清，因為這樣的血清營養豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現這類問題。
6）在細胞培養時要嚴格進行無菌操作，操作時要規范，減少污染的可能性。可以通過試劑盒檢測細胞是否污染，對于已經污染的細胞滅菌后直接處理，避免污染其他細胞。
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