實(shí)驗(yàn)室常用的器材一般包括玻璃器材、金屬器械、橡膠制品及塑料制品等,每類(lèi)器材的處理及。
目前常用的消毒滅菌方法多采用物理方法(如干熱滅菌法、濕熱滅菌法、過(guò)濾除菌法、射線(xiàn)殺菌法等)和化學(xué)方法(消毒劑、抗生素)兩大類(lèi)。
1、濕熱滅菌法
濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進(jìn)行滅菌的方法,壓力蒸汽濕熱滅菌法是目前常用的一種滅菌方法。它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環(huán)境中存在的潛熱作用和良好的穿透力,使菌體蛋白質(zhì)凝固變性而使微生物死亡。適合于布類(lèi)工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸餾水、棉塞、紙和某些培養(yǎng)液的滅菌。

分為三種:
(1)流通蒸氣滅菌法:是指在常壓條件下,采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法,滅菌時(shí)間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌,但不能保證殺滅所有芽孢,是非可靠的滅菌方法。
(2)間歇蒸汽滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法,但要重復(fù)3次以上,每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過(guò)夜,目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫,可將溫度降至75℃~80℃,加熱延長(zhǎng)為30~60分鐘,并增加次數(shù)。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。
(3)高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達(dá)121.3℃,維持15-20分鐘。
2、干熱滅菌法
是利用恒溫干燥箱內(nèi)120ºC~150ºC的高熱,并保持90~120分鐘,殺死細(xì)菌和芽孢,達(dá)到滅菌目的的一種方法。主要適用于不便在壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行滅菌,且不易被高溫?fù)p壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品干燥,易于貯存。酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬于干熱滅菌的方法之一,在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)工作時(shí),常須利用工作臺(tái)面上的酒精燈火焰對(duì)金屬器具及玻璃器皿口緣進(jìn)行補(bǔ)充滅菌。
3、射線(xiàn)滅菌法
利用紫外線(xiàn)燈進(jìn)行照射滅菌的方法。紫外線(xiàn)是一種低能量的電磁輻射,可以殺滅多種微生物。紫外線(xiàn)的作用機(jī)制是通過(guò)對(duì)微生物的核酸及蛋白質(zhì)等的破壞作用而使其滅活。適合于實(shí)驗(yàn)室空氣、地面、操作臺(tái)面滅菌。滅菌時(shí)間為30min。用紫外線(xiàn)殺菌時(shí)應(yīng)注意,不能邊照射邊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,因?yàn)樽贤饩€(xiàn)不僅對(duì)人體皮膚有傷害,而且對(duì)培養(yǎng)物及一些試劑等也會(huì)產(chǎn)生不良影響。
4、化學(xué)消毒劑消毒法
用于那些不能利用物理方法進(jìn)行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者皮膚、某些實(shí)驗(yàn)器皿等。常用的化學(xué)消毒劑包括甲醛、高錳酸鉀、70%~75%乙醇、過(guò)氧乙酸、來(lái)蘇爾水、0.1%新潔爾滅、環(huán)氧乙烷、碘伏或碘酊等。其中利用70%~75%乙醇、0.1%~0.2%氯化汞、10%次氯酸鈉、飽和漂等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)材料的滅菌;利用甲醛加高錳酸鉀[(2mL甲醛+1g高錳酸鉀)/m3]或乙二醇(6mL/m3)等加熱熏蒸法進(jìn)行無(wú)菌室和培養(yǎng)室的消毒。在使用時(shí)應(yīng)注意安全,特別是用在皮膚或?qū)嶒?yàn)材料上的消毒劑,須選用合適的藥劑種類(lèi)、濃度和處理時(shí)間,才能達(dá)到安全和滅菌的目的。
2 干霧過(guò)氧化氫消毒滅菌法
通常是對(duì)實(shí)驗(yàn)室整體環(huán)境包含物表進(jìn)行消殺,采用低濃度過(guò)氧化氫7.5%,配合過(guò)氧化氫干霧消毒器,達(dá)到迅速?gòu)浡麄€(gè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境,通過(guò)密閉消殺,達(dá)到無(wú)死角效果,目前作為主流方式在實(shí)驗(yàn)室及各種實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下廣泛使用,這里需要注意的是,目前市面上過(guò)氧化氫滅菌器在新冠疫情以來(lái),五花八門(mén)的設(shè)備涌現(xiàn)市場(chǎng),實(shí)驗(yàn)室本身配備很多的精密儀器,所以在保證消毒滅菌效果的同時(shí),一定要保證減少化學(xué)消毒液帶來(lái)的腐蝕性風(fēng)險(xiǎn),因此,在選擇過(guò)氧化氫消毒器的同時(shí),一定要主要過(guò)氧化氫消毒器對(duì)消毒液的消耗量,消毒液的配比濃度做為衡量此類(lèi)設(shè)備的!
實(shí)驗(yàn)室環(huán)境滅菌,為保持實(shí)驗(yàn)儀器不被腐蝕,建議過(guò)氧化氫設(shè)備對(duì)消毒液的消耗量滿(mǎn)足消毒技術(shù)規(guī)范下越低越好,采用濃度越低越好!同時(shí)采用過(guò)氧化氫濃度檢測(cè)儀進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)!
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